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用于染色培養細胞標本的制備

更新時間:2012-09-20點擊次數:1772

用于染色的培養細胞既可以是貼壁細胞,也可以是懸浮細胞。貼壁細胞通常使其生長在合適的固相支持物上;懸浮細胞可以直接固定,也可以通過甩片或使用化學黏合劑黏附在固相支持物上。

 
(一)貼壁細胞
 
    貼壁細胞的準備比較簡單,可以使其生長于適當的載玻片、蓋玻片或塑料組織培養皿中。如果實驗要求高分辨率或需拍照,細胞應生長于載玻片或蓋玻片上;如果實驗的分辨率要求不高,或者是大量樣品的篩選,可使細胞生長于塑料組織培養皿中。
 
    將貼壁細胞生長在固相支持物上有其*的優點,操作步驟,如沖洗、固定、通透及染色均較簡單易行,便于同時進行大量不同種類細胞、不同抗體及不同條件下的操作。
 
(二)懸浮細胞
 
    懸浮細胞的制備可以采用多種不同的方法。如果是進行細胞內部抗原的定位,一般可用甩片機將細胞甩在一張載玻片上,也可以先用帶電的交聯劑涂在蓋玻片上,然后再將細胞黏附于蓋玻片上。此后的操作步驟與貼壁細胞相同。
 
    在某些情況下,細胞可在懸浮狀態下染色。這是因為在其后的操作步驟中,需要細胞在懸浮狀態下進行,例如細胞分選。在懸浮狀態下處理細胞更加繁瑣,因為每一洗滌步驟均須離心、再懸浮細胞。
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